ВЛИЯНИЕ НОКАУТА ПО ГЕНАМ TLR9 И AIM2 В ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТКАХ  MCF7 НА ИЗМЕНЕНИЕ ТРАНСКРИПЦИОННОЙ АКТИВНОСТИ МАРКЕРНЫХ  ГЕНОВ ОКСИДАТИВНОГО СТРЕССА И ГИПОКСИИ ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ  ГЦ-ОБОГАЩЕННЫХ ФРАГМЕНТОВ ДНК

Малиновская, Е.М.; Кожина, Е.А.; Ершова, Е.С.; Конькова, М.С.; Вейко, В.П.; Бобровский, П.А.; Лазарев, В.Н.; Каменева, Л.В.; Писарев, В.М.; Вейко, Н.Н.; Костюк, С.В.; Malinovskaya, E.M.; Kozhina, E.A.; Ershova, E.S.; Kon’kova, M.S.; Veiko, V.P.; Bobrovsky, P.A.; Lazarev, V.N.; Kameneva, L.V.; Pisarev, V.M.; Veiko, N.N.; Kostyuk, S.V.

ВЛИЯНИЕ НОКАУТА ПО ГЕНАМ TLR9 И AIM2 В ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТКАХ MCF7 НА ИЗМЕНЕНИЕ ТРАНСКРИПЦИОННОЙ АКТИВНОСТИ МАРКЕРНЫХ ГЕНОВ ОКСИДАТИВНОГО СТРЕССА И ГИПОКСИИ ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ ГЦ-ОБОГАЩЕННЫХ ФРАГМЕНТОВ ДНК

Малиновская, Е.М., Кожина, Е.А., Ершова, Е.С., Конькова, М.С., Вейко, В.П., Бобровский, П.А., Лазарев, В.Н., Каменева, Л.В., Писарев, В.М., Вейко, Н.Н., Костюк, С.В.

Дата публикации: 2020

Аннотация:

Цель исследования. Определить влияние GC-богатых фрагментов ДНК (GC-ДНК) на экспрессию маркерных генов ги поксии и окислительного стресса в клетках рака молочной железы MCF7, нокаутированных по генам TLR9 и AIM2, коди рующих внутриклеточные сенсорные молекулы ДНК. Материал и методы. Исследование проведено на интактных клетках MCF7, четырех клонах клеток MCF7, нокаутиро ванных по гену TLR9 (TLR9-/- ), и двух клонах клеток MCF7, нокаутированных по гену AIM2 (AIM2-/- ). Уровень экспрессии белков определяли методом проточной цитофлуориметрии. Уровень экспрессии генов определяли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени. Результаты. Нокаутные культуры MCF7, в отличие от интактных, отвечают на стимуляцию фрагментов GC-ДНК снижением оксидативного стресса и транскрипционной активности генов маркеров гипоксии, что приводит к увеличению выживаемости раковых клеток. Выводы. Доказана ключевая роль сенсоров ДНК TLR9 и AIM2 как триггеров, способствующих выживанию адаптив ных реакций злокачественных клеток на GC-обогащенные фрагменты ДНК опухолевого ландшафта.

ключевые слова:
GC-вкДНК, клеточная линия MCF7, генные регуляторные сети, ВАК

Издатель: Издательство "ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России"

Тип: Article

УДК 575.113: 576.316:577.21

EFFECT OF TLR9/AIM2 GENE KNOCKOUT IN MCF7 TUMOR CELLS ON ALTERATIONS OF OXIDATIVE STRESS AND HYPOXIA MARKER GENE EXPRESSION IN RESPONSE TO GC-ENRICHED DNA FRAGMENTS

Malinovskaya, E.M., Kozhina, E.A., Ershova, E.S., Kon’kova, M.S., Veiko, V.P., Bobrovsky, P.A., Lazarev, V.N., Kameneva, L.V., Pisarev, V.M., Veiko, N.N., Kostyuk, S.V.

Publication date: 2020

Abstract:

The purpose of this study was to determine the influence of GC-DNA on the expression of hypoxia and oxidative stress marker genes in breast cancer MCF7 cells knocked out for the TLR9 and AIM2 encoding intracellular DNA sensor molecules. Material and methods. The study was conducted on intact MCF7 cells, four clones of MCF7 cells knocked out by the TLR9 gene (TLR9-/- ), and two clones of MCF7 cells knocked out by the AIM2 gene (AIM2-/- ). The protein expression was determined by flow cytofluorometry. The gene expression in cells was studied by real-time PCR. Results. The results of the study showed that knockout MCF7 cultures, in contrast to intact ones, respond to GC-DNA frag ments stimulation by reducing the oxidative stress and hypoxia marker genes transcriptional activity both resulted in increased sur vival of cancer cells. Conclusions. The key role of TLR9 and AIM2 DNA sensors as triggers of adaptive survival-promoting responses of malignant cells to the CG- DNA fragments originated from the tumor landscape has been proved.

Keywords:
GC-DNA, cell line MCF7, gene regulatory networks

Издатель: Издательство "ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России"

Тип: Article

УДК 575.113: 576.316:577.21

EFFECT OF TLR9/AIM2 GENE KNOCKOUT IN MCF7 TUMOR CELLS ON ALTERATIONS OF OXIDATIVE STRESS AND HYPOXIA MARKER GENE EXPRESSION IN RESPONSE TO GC-ENRICHED DNA FRAGMENTS

Фасеты

Оппонент

Научный руководитель

Авторы

Ключевые слова

Год